總大腸菌群是一群能發酵乳糖、產酸產氣、需氧和兼性厭氧、革蘭氏陰性的無芽孢桿菌。總大腸菌群主要來源于人畜糞便，是水源是否受到糞便污染的主要標準。目前，總大腸菌群是國內外檢測生活飲用水污染情況的重要指標。總大腸菌群作為評價飲用水衛生質量的重要指標之一，它的檢測具有廣泛的衛生學意義。目前，中國環保部門檢測總大腸菌群的方法主要有多管發酵法(Multiple-tube fermentation, MTF)、濾膜法(Membranefilter, MF)、快速紙片法(Paperstrip method)。其中發酵法是傳統的檢測方法，這種檢測技術普遍得到了世界各國的應用。該檢測方法的優點是檢測原理簡單，檢測人員經過基本的微生物學培訓就可以操作。濾膜法檢測總大腸菌群成本較低，操作步驟比較簡單。

快速紙片法以其操作簡便、檢測周期短等優點目前備受檢測人員的青睞，多管發酵法和濾膜法目前已經被世界各國實驗室和世界各組織機構認可，這3種方法已經被認定為國家標準方法。

多管發酵法、濾膜法和快速紙片法應用于總大腸菌群檢測中，都能準確地評價水樣受到總大腸菌群污染的狀況，但是3種方法都有各自的優缺點，在實際檢測中應該根據具體情況分析選擇適合的檢測方法。通過對總大腸菌群檢測方法的分析比較，多管發酵法準備工作量大，操作復雜，周期長，不適于大量樣品的分析，也不能對水的衛生學狀況作出快速評價，無法滿足樣品快速檢測的需求。濾膜法是一種科學可行的檢驗方法，適用于飲用水和混濁度較小的水樣。快速紙片法操作簡便、檢測周期短，也已經列入生活飲用水標準檢測方法，極有可能在近期成為評價水質污染的快速檢測方法之一。

濾膜法檢測周期較短，最短只需要24 h，并且不需要驗證試驗。在本試驗中，濾膜法較其他兩種方法檢測結果偏低，原因是菌落在濾膜上分布不均勻，導致菌落辨別時存在干擾。快速紙片法檢測總大腸菌群成本較高，但檢測結果可靠，能夠較精確地判斷水樣的污染狀況。從檢測結果來看，3種方法檢測結果無顯著差異，但是快速紙片法檢出率陽性略高于發酵法和濾膜法，因此可以推斷快速紙片法的敏感性略高于發酵法和濾膜法。

對多管發酵法、濾膜法和快速紙片法的檢測結果進行統計學比較，在120份水樣中，多管發酵法共檢出總大腸菌群23份，濾膜法共檢出總大腸菌群21份，采用快速紙片法共檢出總大腸菌群25份，3種不同方法對比，檢測結果無顯著差異(P>0.05)。

多管發酵法和濾膜法是傳統的檢測大腸菌群的方法，缺點是操作步驟比較繁瑣，檢測周期長，干擾因素多，并且需要進行驗證試驗。但是這類檢測方法操作技術比較簡單，容易進行，并且檢測費用低。尤其是多管發酵法，目前仍然是水體污染監測中最主要的檢測方法。快速紙片法克服了前兩種檢測方法的不足，優化了檢測過程。快速紙片法操作更簡便，檢測時間短，無須提前準備培養基，并且不需要進行驗證試驗，能夠準確地判斷水樣的總大腸菌群污染狀況，并且此種方法已經被列為國家標準檢驗法。

快速紙片法是以紙片作為培養基載體，將總大腸菌群生長過程所需要的營養物質、指示劑以及能夠抑制革蘭氏陽性細菌生長的物質附著在紙片上，細菌在繁殖時，在37℃下培養24 h，觀察結果。試驗過程中，每個水樣按3個10倍濃度梯度接種，共接種15張紙片。其中5張大紙片接種10 m L水樣，5張小紙片接種1 mL水樣，另外5張小紙片接種1∶10稀釋水樣1 mL。紙片上出現紅斑或者紅色菌落而且周圍變黃色的為陽性。根據陽性紙片張數，查MPN值表，然后計算每升水樣中總大腸菌群數的最近似值。

將水樣注入已滅菌的濾器中，采用0.45μm的微孔濾膜過濾水樣，經過抽濾，細菌被截留在膜上，然后將濾膜貼于M-FC(品紅亞硫酸鈉)培養基上，在37℃下培養24 h。總大腸菌群在濾膜上長出黃色的特征菌落，直接計數此類菌落數目，計算每升水樣中含的總大腸菌群數。對于可疑的菌落，可取一部分進行涂片、染色、鏡檢。另一部分接種于EC培養液內，經37℃培養24 h后觀察是否產氣，如果產氣則證明為總大腸菌群。然后計算每升水樣中總大腸菌群數的最近似值。

利用總大腸菌群繁殖時能夠發酵乳糖、產酸產氣，并能使乳糖蛋白胨培養液變黃，同時產生氣泡。初發酵試驗：將水樣充分混勻后，根據水樣污染的程度進行適當稀釋。取每個樣品1.00、0.10、0.01 mL分別接種到盛有乳糖蛋白胨培養液的發酵管中，在37℃下培養24 h。產酸和產氣的發酵管試驗結果表明，水樣中存在可疑菌群。復發酵試驗：將可疑菌落繼續接種到EC培養基上并在37℃培養24 h，在培養期間如果仍然產酸產氣，則認定可疑菌落為總大腸菌群。依據陽性發酵管的數量查MPN表，計算每升水樣中總大腸菌群數的最近似值。

本研究通過對比分析多管發酵法、濾膜法以及快速紙片法檢測生活飲用水中總大腸菌群的試驗結果，探討3種方法在生活飲用水中的總大腸菌群檢測中的應用情況。